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Golden 1st cDNA Synthesis Kit（with dsDNase）
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Golden 1st cDNA Synthesis Kit（with dsDNase）商品屬性：
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
Golden 1st cDNA Synthesis Kit（with dsDNase）
100T
BJ-PJ6630
商品介紹：描述：
本試劑盒采用穩(wěn)定高效的反轉(zhuǎn)錄預(yù)混體系 5×GoldenRT MasterMix 進(jìn)行 RNA 的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，使用時只需加入模板、引物和 RNase Free H2O 即可，大大簡化了操作過程、提高了效率、減少了操作過程中的人為誤差。MasterMix 中添加了 HL dsDNase（熱敏雙鏈特異性核酸酶），該雙鏈特異性核酸酶（又名 gDNA Remover）可在反轉(zhuǎn)錄的過程中，直接降解去除 RNA 中殘留的基因組 DNA 污染(可去除100ng 基因組 DNA)，從而在定量 PCR 的檢測中無需考慮基因組污染的干擾，設(shè)計的定量 PCR 引物也無需進(jìn)行橫跨外顯子。該試劑盒尤其適用于定量 PCR 檢測。該預(yù)混體系包含點突變致 RNase H 活性缺失的Golden MLV Reverse Transcriptase 反轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、反應(yīng) Buffer、HL dsDNase 和 RNase Inhibitor。該試劑盒采用的反轉(zhuǎn)錄酶去除了 RNase H 活性，從而避免反轉(zhuǎn)錄過程中降解 RNA。同時經(jīng)過突變文庫篩選，使得其熱穩(wěn)定性更強(qiáng)，可耐受 55℃高溫反應(yīng)。相比于低溫條件下反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，采用高溫反轉(zhuǎn)錄可顯著打開 RNA 二級結(jié)構(gòu)，從而提高復(fù)雜 RNA模板的擴(kuò)增性能、提高反轉(zhuǎn)錄 cDNA 的長度和產(chǎn)量，從而提高后續(xù)檢測的靈敏度。合成的第一鏈 cDNA 可廣泛用于 2ndStrand 的合成、雜交、PCR 擴(kuò)增、Real-Time PCR 反應(yīng)等。
應(yīng)用：
（1）該制品可有效反轉(zhuǎn)錄 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA
（2）該制品不可反轉(zhuǎn)錄 microRNA、病毒 DNA/RNA 樣品
儲存：請置于-20°C，可保存 3 年；避免反復(fù)凍融。
注：如 5×Golden RT MasterMix (with dsDNase)出現(xiàn)沉淀屬正常現(xiàn)象，可用手捂化，混合均勻后使用不影響實驗結(jié)果。
注：通常在定量 PCR 實驗中使用快速程序進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄效率>80%），在進(jìn)行高 GC 含量、含復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)、長片段的模板轉(zhuǎn)錄時采用標(biāo)準(zhǔn)程序（反轉(zhuǎn)錄效率>100%）。
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