胃蛋白酶（Pepsin）試劑盒微量法測定步驟

 測定原理：

胃蛋白酶可催化血紅蛋白水解，水解產物與福林試劑反應后顯藍色；一定范圍內，其顏色的深淺與胃蛋白酶活性呈正比。

測定步驟：

1.分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長到580 nm，蒸餾水調零。

2. 試劑三和試劑四置于37℃水浴預熱30min。

3. 標準管：取微量玻璃比色皿/96孔板，加入20μL標準品，40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于580 nm測光吸收，記為A標準管。

4. 空白管：取微量玻璃比色皿/96孔板，加入20μL蒸餾水，40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于 580 nm測光吸收，記為A標準空白管。

5. 對照管：取 EP管，加入100 μL蒸餾水，置于37℃水浴保溫10min；加入100μL試劑四，蓋緊后搖勻1min；加入20μL粗酶液，混勻后8000g 4℃離心10分鐘取上清；在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL，再加入40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于580 nm測光吸收，記為A空白管。

6. 測定管：取 EP管，加入20μL粗酶液，100μL試劑三，置于37℃水浴保溫10min；加入100μL試劑四，蓋緊后搖勻1min；8000g 4℃離心10分鐘取上清；在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL，再加入40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于 580 nm測光吸收，記為A測定管。

注意：空白管和標準管只需要測定一次。

測定意義：                           

胃蛋白酶由胃粘膜主細胞分泌，分解食物中蛋白質成小肽段。一般用于神經性低酸癥的鑒別，慢性胃炎、慢性胃擴張、慢性十二指腸炎等癥狀時也會引起胃蛋白酶分泌的減少。