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分享評估ELISA試劑盒的質量指標

ELISA全稱為酶聯免疫吸附試驗(Enzyme-linked Immunosorbent Assay ),是當前應用最為廣泛的一項定性/定量檢測抗體(抗原)的免疫酶技術。ELISA是將抗原、抗體的免疫反應和酶的高效催化反應有機結合而發展起來的一種綜合性技術。固定在載體表面的抗原或者抗體不會失活,仍然保留其免疫反應性。酶標記的抗體或者抗原既具有免疫學活性,還具有酶的催化活性。在實際檢測時,首先將抗原或者抗體固定在固相載體上。然后加入檢測對象,讓待測物質與固相化物質結合,形成固相化的“抗原—抗體”復合物。再加入酶標記的抗體或者抗原,與固相化的復合物結合,形成酶標復合物。最后加入底物溶液,發生酶催化底物顯色反應,根據顏色深淺進行定性或定量分析。下面分享評估ELISA試劑盒的質量指標:

 1、特異性

特異性簡單來說就是陰性樣本的陰性檢出率,要保證這一點首先就需要做到與其他檢測抗體(原)無交叉感染,并且保證陰性樣本檢出的準確性。

2、靈敏度

靈敏度簡單來說就是陽性樣本的陽性檢出率,一方面能夠反映出試劑盒對于被檢物質的最低檢測能力,另一方面需要保證陽性樣本檢出的準確性。可通過我們自身待檢物質的性質進行選擇,如果我們待檢物質濃度量很低,可以選擇高靈敏的試劑。

3、精密性

又可稱作重復性,一般而言,對于ELISA試劑盒而言,板間及板內精密性可控制在15%以內。有些ELISA試劑盒精密性可達到10%以內。

4、穩定性

穩定性是試劑盒必須有的基本屬性,是指試劑(盒)在有效期內和規定條件下保持其性能的能力,一般有效期穩定性、運輸穩定性、以及凍融穩定性。

5、操作簡便性

同樣對于ELISA的操作簡便程度大家也是非常關心的,操作時間以及操作步驟也是我們在選擇試劑盒過程中需要考慮的問題。

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