淀粉含量試劑盒都是如此好用

    測定原理： 利用 80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖， 采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量，即可計算淀粉含量。

    測定意義： 淀粉是植物中糖的主要儲存形式，其含量測定對于評價食品營養價值和調查植物體內糖代謝 都有重要意義。

    需自備的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰、濃 硫酸（不允許快遞）和蒸餾水。

    試劑的組成和配制：

    試劑一：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

    試劑二：液體 105mL×1 瓶，4℃保存；

    試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；

    淀粉提取：

    1、 稱取 0.1~0.2g 樣本（建議稱取約 0.1g 樣本）于研缽中研碎，加入 1mL 試劑一，充分勻 漿后轉移到 EP 管中，80℃水浴提取 30min，3000g，25℃離心 5min，棄上清，留沉淀。

    2、 沉淀中加入 0.5mL 蒸餾水，放入 95℃水浴中糊化 15min（蓋緊，以防止水分散失）。

    3、 冷卻后，加入 0.35mL 試劑二，25℃常溫提取 15min，振蕩 3-5 次。

    4、 加入 0.85mL 蒸餾水，混勻，3000g，25℃離心 10min，取上清液待測。

    測定步驟：

    1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 620nm，蒸餾水調零。

    2、 調節水浴鍋至 95 度。

    3、工作液的配制：臨用前在試劑三中加入 3.75mL 蒸餾水后，緩慢加入 21.25mL 濃硫酸， 不斷攪拌，充分溶解，待用；用不完的試劑 4℃保存一周；

    4、樣本測定：取50μL樣本和250μL工作液至EP管中，95度水浴10 min（蓋緊，防止水分散 失），自然冷卻至室溫，取200uL至微量石英比色皿或96孔板中，在620 nm 波長下記錄測 定吸光度值A。

    淀粉含量計算：

    a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下 標準條件下測定的回歸方程為 y = 5.872x - 0.0295；x 為標準品濃度（mg/mL），y 為吸光值。

    1、按照蛋白濃度計算 淀粉含量（mg/mg prot）=[（A+0.0295）×V1]÷5.872 ÷（V1×Cpr）=0.17×（A+0.0295） ÷Cpr 2、按樣本鮮重計算 淀粉含量（mg/g 鮮重）= [（A+0.0295）×V1] ÷5.872÷（W×V1÷V2） =0.289×（A+0.0295） ÷W V1：加入反應體系中樣本體積，0.05mL；V2：加入提取液體積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質 濃度，mg/mL；W：樣本質量，g

    b.用 96 孔板測定的計算公式如下 標準條件下測定的回歸方程為 y = 2.936x - 0.0295；x 為標準品濃度（mg/mL），y 為吸光值。

    1、按照蛋白濃度計算 淀粉含量（mg/mg prot）=[（A+0.0295）×V1]÷2.936 ÷（V1×Cpr）=0.34×（A+0.0295） ÷Cpr 2、按樣本鮮重計算 淀粉含量（mg/g 鮮重）=[（A+0.0295）×V1]÷2.936÷（W×V1÷V2） =0.578×（A+0.0295） ÷W V1：加入反應體系中樣本體積，0.05mL；V2：加入提取液體積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質 濃度，mg/mL；W：樣本質量，g

    注意：由于工作液具有強腐蝕性，請謹慎操作。  若吸光值大于1，請將樣本用提取液稀釋后再測定，計算公式中乘以相應的稀釋倍數。 提取液的配置：0.35mL 試劑二+1.35mL 水。用多少按照此比例配多少。